黑龙江36选7（部）实验针灸学教研室编

一、实验课程简介

实验课是《实验针灸学》课程的重要组成部分，是培养学生实验动手能力、设计能力，巩固、加深对针灸学科学内涵的认识和理解，启发学生创新思维的重要实践平台。

《实验针灸学》实验课包含7个实验项目，分别是：

一、 循经感传的激发、测定及客观显示

二、 人体经穴电学特性探测

三、 针刺“足三里”穴对家兔末梢血白细胞数影响的时间-效应观察

四、 不同干预对小鼠痛阈影响的实验观察

五、 不同干预对小鼠耐缺氧能力影响的实验观察

六、 不同干预对失血性休克家兔血压影响的实验观察

七、 针灸治疗新技术和电针参数客观显示

在部分实验课中，实验内容除规定性实验外，还增设了“自设计实验”内容，引导学生在完成规定实验的同时，可根据自己所学的中医针灸学知识，或根据自己在学习中存在的疑问进行自设计实验，以调动和激发学生们实验的积极性和思维的创新性。

二、实验课程目标

知识目标：通过实验以验证理论课的相关知识点，加深对针灸科学内涵的认识和理解。

技能目标：熟悉相关的实验技能；能运用所学的科研基本程序和方法进行实验设计的能力；培养学生的分析、总结和提炼能力，以及创新思维能力。

学习态度目标：

(1)对所学理论知识的怀疑精神，通过实验进行科学实证的科研态度；

(2)通过自设计实验环节，培养学生的主动探索精神以及善于发现问题和分析问题的态度。

(3)通过实验后的课堂总结讨论环节，培养学生积极思考，主动分析的学习态度，通过教师引导，梳理实验过程，正确看待实验数据，培养学生认真严谨、实事求是的实验态度，提高学生的科研素养。

三、实验项目

（一）实验项目一：循经感传的激发、测定及客观显示

1、实验项目学时：3学时

2、实验项目类型：综合性实验

3、实验项目内容：

l 实验对象：班级同学

l 干预方法：电针、手针或艾灸

l 观察指标：循经感传的程度、基本性质和红外热像特征的客观显示

l 实验步骤：

（1）循经感传程度的测定

受试者平卧，安静休息5分钟以上。暴露一侧的上肢或下肢，任选一种刺激方式刺激原穴或合穴，如“合谷”或“足三里”，并使之得气。应用电针时，选择疏密波，输出脉冲频率调至5～10Hz，输出电流强度以受试者有明显的麻胀感为度。应用艾灸时，艾灸时间30min。

按所学的相关标准记录各经感传情况，并对受试者循经感传程度予以评价。

（2）感传基本性质的观察

受试者平卧，安静休息5分钟以上。暴露一侧的上肢或下肢，任选一种刺激方式刺激原穴或合穴，如“合谷”或“足三里”，并使之得气。令受试者主诉感传方向、路线、性质、宽度和感传所到器官的效应。用软尺测量感传路线的长度，用秒表测量感传时间，计算出感传速度（感传速度=感传路程/感传时间）。用手指按压经脉线，观察有无感传阻滞情况。

（3）感传路线的红外热像显示

待受试者出现循经感传后，应用红外热像仪客观显示循经感传路线上的红外热像特征。

l 自设计实验：

在完成规定实验的基础上，同学们可从不同干预手段，不同穴位选择、不同针刺手法及干预时间等入手，结合已学的理论课知识和自己的学习体会，自行设计循经感传的相关实验并记录实验结果。

4、实验项目学习要求：

（1）运用知识：循经感传程度的激发与控制；循经感传的特征；循经感传的影响因素

（2）提高能力：1.熟悉循经感传的各种影响因素，提高循经感传的激发能力；在今后的临床实践中，能主动的运用激发循经感传的有力因素，避开不利因素，通过循经感传的有效激发，提高针灸的临床疗效。2.通过课堂总结提高学生的分析问题、总结问题和提炼表达能力。

5、主要仪器设备与材料：电针仪、毫针、艾条、75%酒精棉、打火机、软尺、秒表。

6、与理论课程的关系：本实验项目与第一章 第一节经脉现象内容相关。理论课中已学习经脉现象中的循经感传现象，并学习了其激发方法、特征和影响因素。通过实验课，让同学们亲身体验循经感传现象，从而对理论课知识有更深入的感性认知和理解。

（二）实验项目二：人体经穴电学特性探测

1、实验项目学时：3学时

2、实验项目类型：综合性实验

3、实验项目内容：说明实验项目内容。

l 实验对象：班级同学

l 干预方法：电针、手针或艾灸

l 观察指标：电阻

l 实验步骤：

（1）心包经经穴低电阻特性探测

在受试者腕部与肘部之间的心包经经脉上，选取若干穴点或在经非穴点（以穴位或经脉线上任一点为中心，直径为1cm的圆圈），并等距取其左右旁开非经非穴点为对照点（如图1）。受试者静卧10分钟后，手握无关电极（参考电极），测试者将探测电极端头用生理盐水棉签轻轻擦拭，置于被测部位（压力恒定），按动测试开关，进行电阻测定，可显示出测定值。测量3次，记录穴点及旁开点的测定电阻值，并计算平均值。

图1 心包经经穴点及非经非穴点示意图

（2）常用腧穴低电阻特性探测：

取受试者合谷、内关、尺泽、足三里、阳陵泉、三阴交、太冲，左右共14个穴位。以穴点为中心、直径1cm的圆圈内作为穴区。旁开对照测试点选在各穴旁开的非经非穴处，可选1~2点。用棉签蘸乙醇轻轻将穴区皮肤擦净后，以红色水彩笔于穴点处作标记。受试者静卧10分钟，使精神及肌肉放松。测定方法同上。

（3）健康人体两侧井穴、原穴皮肤电阻对称性观察：

按经典取穴方法取受试者两侧的井穴少商、商阳，原穴神门、大陵。用生理盐水棉签清洁穴区后，以红色水彩笔标记。受试者静卧10分钟，使精神及肌肉放松。测定方法同上。计算对称系数，对称系数=左侧电阻值/右侧电阻值

l 自设计实验

在完成规定实验的基础上，同学们可开展自设计实验，如观察给予不同的穴位刺激后，电阻是否发生变化；或病理状态下，电阻是否有变化；也可观察五输穴的电阻的变化是否有规律等等。

4、实验项目学习要求：

（1）运用知识：穴位电阻探测

（2）提高能力：1.掌握穴位电阻探测技术，了解探测皮肤电阻的影响因素，从而能准确的探测电阻；2.对穴位电阻特性有更深入的认识和理解，能将穴位电阻探测应用于临床实践的能力，如穴位定位、通过病理状态穴位电阻的变化以协助诊断疾病或判断预后等。3.通过自设计实验提高学生的创新能力，通过课堂总结提高学生的分析问题、总结问题和逻辑表达能力。

5、主要仪器设备与材料：经络腧穴电阻探测仪（黑龙江36选7针灸学院研制），红、蓝水彩笔，生理盐水，75%乙醇，棉球、针灸针、艾条等。

6、与理论课程的关系：本实验项目与第一章 第二节穴位内容相关。理论课中已学习穴位的生物物理学特性。通过实验课，能对其中穴位的电学特性有更深入的理解和认识。

（三）实验项目三：针刺“足三里”穴对家兔末梢血白细胞数影响的时间-效应观察

1、实验项目学时：4学时

2、实验项目类型：综合性实验

3、实验项目内容：

l 实验对象：健康家兔，体重2～2.5Kg

l 干预方法：针刺足三里

l 观察指标：白细胞数

l 实验步骤：

（1）准备7个试管（其中2个备用），标明序号，内装0.38ml醋酸龙胆紫溶液。

（2）将家兔固定，拔毛，用三棱针刺破耳缘静脉，用毛吸管吸血至第2个刻度线 （0.02ml），略超过一些，用棉球擦减至第2个刻度线。

（3）将血液挤入装有醋酸龙胆紫溶液的试管内，小心吸入少量稀释液冲洗，以冲下附在吸管壁上的血液，轻轻摇匀，待测。

（4）将盖玻片置于血细胞计数板上，用移液管将稀释好的血液滴入盖玻片边缘，靠虹吸作用吸入

（5）静置2～3分钟后，在显微镜下计数。显微镜镜头选用低倍镜（目镜×10，物镜×10），找到计数板白细胞计数格后计数；计数时，要注意显微镜的载物台绝对平置，不能倾斜，以免血细胞向一边集中，计数方法如下：

图2 血细胞计数板示意图

如图2所示，计数池的平台距盖玻片0.1mm，中心部位划分为9个大方格，每个大方格长、宽都是1mm，故1个大方格体积为 0.1mm³。四角的大方格各由16个中方格组成，适用于白细胞计数；压线者计上不计下，计左不计右。设四角4个大方格的白细胞总数为X ，其平均值即为 X/4，则白细胞数/mm3= X/4×10×20=50X （10表示体积扩增10倍，即有0.1mm³ 变为1mm³；20为白细胞被醋酸龙胆紫溶液稀释的倍数）。

（6）电针家兔“足三里”穴2min后，频率10Hz，波形为疏密波，强度以针柄微微颤动为度，取针刺后即刻 、10min、20min、30min耳缘静脉血，计数白细胞。最后将实验结果绘成一条时间-效应曲线。

l 自设计实验

在学生分组中，选择1-2组进行自设计实验，即同学们可以选取不同穴位，或采用不同的干预措施，观察该措施对正常家兔白细胞数的影响。

4、实验项目学习要求：

（1）运用知识：针灸作用的时效特点；针灸对免疫系统的作用；针灸治未病；

（2）提高能力：1.熟悉相关实验技能；2.观察针灸对白细胞的影响，能联想到针灸对免疫系统的影响，能运用本实验的结果解释针灸治未病的部分原理；3.验证针灸的时效特点，能联想到为临床的针刺、艾灸刺激时间的确定提供实验依据；4.通过课堂总结提高学生的分析问题、总结问题和提炼表达能力。

5、主要仪器设备与材料：电针仪、兔盒、光学显微镜、10ml试管（盛有0.38ml的醋酸龙胆紫溶液）、血细胞计数板、盖玻片、微量取血器、毛吸管、移液管、1寸毫针等。

6、与理论课程的关系：本实验项目与第五章 第二节针灸作用效应的时间特点相关。理论课中已学习针灸的时效特点分为潜伏期、上升期、高峰期和下降期。通过实验课，能对这一时效特点有更深入的认识。

（四）实验项目四：不同干预对健康小鼠痛阈影响的实验观察

1、实验项目学时：4学时

2、实验项目类型：综合性实验

3、实验项目内容：

l 实验对象：健康小鼠

l 干预方法：针刺足三里或其他干预方式

l 观察指标：痛阈（甩尾阈）

l 实验步骤：

（1）用碳素笔分别在小鼠背部编号。

（2）测基础痛阈  把小鼠固定于甩尾测痛仪的筒架内，鼠尾伸直放平在测痛仪的槽内，用生理盐水在鼠尾轻轻擦拭，并在尾部对应光点处做标记（保证每次测量同一部位）。打开电源开关，灯亮时开始计时，当小鼠甩尾时立即关闭电源，停止计时，记录时间数值作为痛阈值。每隔五分钟测一次，共测2次，取平均值作为基础痛阈。

（3）分组及针刺干预  随机分组，其中一组为空白对照组；一组为针刺双侧足三里穴组。针刺三分钟之后起针，分别测量即刻、10min、20min、30min的痛阈并记录。

（4）自设计组  同学们可根据另设一组自设计组，选用提供的药物（如安痛定等），或选取不同穴位，不同刺激方式，观察其他干预措施对小鼠痛域的影响。

4、实验项目学习要求：

（1）运用知识：针刺镇痛作用；针灸作用效应的基本特点；影响针灸作用效应的因素

（2）提高能力：1.熟悉小鼠甩尾阈的测定方法；2.进一步加深对针刺镇痛特点的认识，体会不同干预方式对针刺效应的影响；3.通过实验结果能总结出针灸作用的部分特点；4.通过课堂总结提高学生的分析问题、总结问题和提炼表达能力。

5、主要仪器设备与材料：小鼠固定台、固定夹、黑色碳素笔、消毒棉签、YLS-12A鼠尾光照测痛仪、毫针、艾灸、相关药品。

6、与理论课程的关系：本实验项目与第四章 第一节针刺镇痛作用及机理，以及第五章 针灸作用效应的基本特点相关。理论课中已学习了针刺镇痛作用的特点，针灸作用效应的基本特点、时效特点和影响因素。通过实验课，能对这些知识内容有更深入的认识。

（五）实验项目五：不同干预对小鼠耐缺氧能力影响的实验观察

1、实验项目学时：4学时

2、实验项目类型：综合性实验

3、实验项目内容：

l 实验对象：健康小鼠

l 干预方法：针刺足三里、人中或其他干预方式

l 观察指标：耐缺氧能力（密闭空间的存活时间）

l 实验步骤：

（1）用天平称5g新鲜干燥的钠石灰；

（2）在广口瓶的瓶塞上均匀涂抹一层凡士林，将称好的钠石灰装入广口瓶内，盖紧瓶塞备用；

（3）将小鼠称重，并根据体重分层后进行随机分组（即分层随机），可选择分为：空白对照组、针刺组（人中组、足三里组）、艾灸组 、药 物注射组等，并做好标记；同时将广口瓶贴好标签；

（4）抓取小鼠并固定于手心中，进行不同干预。如：针刺组可以针刺小鼠“人中”穴、“足三里”穴、手法以捻转为主，平补平泻，行针2分钟后拔针 ；艾灸组可以对小鼠“关元”穴施灸5分钟；药物注射组可以对小鼠行腹腔注射不同药物等等。

（5）将上述处理后的每只小鼠分别装入盛有钠石灰、贴好标签的广口瓶中，迅速盖紧瓶塞，立即开始计时；

（6）随时观察瓶内小鼠的情况，若发现小鼠呼吸停止，立即记录其死亡时间；

（7）比较不同组小鼠耐缺氧时间（即：从小鼠开始装入瓶内至呼吸停止的时间），进行分析总结。

l 自设计实验

同学们可根据以往的学习知识，采用所给的药品（尼可刹米、肾上腺素、生脉注射液）、或造成不同的动物模型等，观察不同因素对小鼠耐缺氧时间的影响。

4、实验项目学习要求：

（1）运用知识：针刺提高耐缺氧能力效应；针灸作用的品质调节特点

（2）提高能力：1.验证针刺提高耐缺氧能力效应；2通过实验能联想到针灸作用的品质调节特点，针灸治未病作用等；3.通过课堂总结提高学生的分析问题、总结问题和提炼表达能力。

5、主要仪器设备与材料：  120ml广口瓶、天平、毫针、艾条、秒表、钠石灰、凡士林、标记笔、注射器等。

6、与理论课程的关系：本实验项目与第四章 第二节针灸调节个系统作用及机理、以及第五章 针灸作用效应的基本特点相关。

（六）实验项目六：针刺“素髎”穴对失血性休克家兔血压影响的实验观察

1、实验项目学时：4学时

2、实验项目类型：验证性实验

3、实验项目内容：

l 实验对象：健康家兔

l 干预方法：针刺足三里或其他干预方式

l 观察指标：血压

l 实验步骤：

（1）家兔称重，耳缘静脉注射20%氨基甲酸乙酯（5ml/kg），注意前半量正常速度给药，后半量慢推，并注意观察家兔角膜反射。当家兔角膜反射消失、肌肉松弛、呼吸均匀时，即表示麻醉成功。

（2）固定家兔，使其呈仰卧位。剪毛备皮（颈部及腹股沟部）。

（3）沿颈部正中线剪开颈部皮肤7～10cm，然后用止血钳钝性分离肌层。注意勿伤及皮下静脉，以防止出血。

（4）暴露气管，并与周围结缔组织分离，穿一根手术线以备结扎；之后倒“T”字形剪开气管，插入气管插管，手术线结扎并用余线攀扎气管插管的分叉处，防止松脱。

（5）打开三通管，用注射器吸取少量肝素，经三通管向血压换能器压力仓及动脉插管中注入，勿使其中有气泡，然后将三通管调为三不通备用。

（6）接通血压换能器，调整仪器，将家兔血压单位选择为mmHg。

（7）分离一侧颈总动脉约3cm，注意尽量将动脉分离干净。穿两根手术线备用（手术线事先泡在生理盐水中），一根结扎动脉远心端，另一根于近心端打一个活结备用，之后用动脉夹夹闭近心端（勿夹在活结上）。

（8）用眼科剪在颈总动脉远心端结扎线的近心侧剪一斜切口，切口约为管径一半，向心方向插入动脉插管，插入深度约1.5-2cm，将备留的活结系紧已固定插管，防止松脱。勿挪动动脉插管，胶布固定压力换能器于兔台上，并防止插管刺破血管。

（9）打开三通管调整为动脉插管与血压换能器通，松开动脉夹，待血压稳定后记录失血前家兔正常血压值。动脉夹夹闭动脉。

（10）调整三通管并接通注射器，松开动脉夹，用注射器抽吸放血30～50ml，观察血压下降至50mmHg时停止放血，观察血压变化情况，待血压稳定后记录血压值。

（11）注射器吸取少量肝素从三通管处回推入动脉插管，防止凝血。调整三通管为动脉插管与血压换能器通。

（12）针刺“素髎”，观察针后血压变化情况，刺激15分钟，间歇捻转行针，待血压稳定后记录针后家兔血压值。

（13）停针后观察血压变化情况15-20分钟。

（14）比较针刺前后血压变化程度及持续时间。

l 自设计实验

在学生分组中，选择1-2组进行自设计实验，即同学们可以选取不同穴位，或采用不同的干预措施，观察该措施对失血性休克家兔血压的影响。

4、实验项目学习要求：

（1）运用知识：针刺对血压的调节作用

（2）提高能力：熟悉失血性休克动物模型的制作及动物血压的测量方法；2通过实验能联想到针灸作用的自限调节特点，针灸的急救作用等；3.通过课堂总结提高学生的分析问题、总结问题和提炼表达能力。

5、主要仪器设备与材料：BL-420多道生物信号记录系统、压力换能器、三通管、兔台、动脉插管、动脉夹、婴儿秤、常规手术器械（眼科镊子、眼科剪、大剪子、镊子、手术线等）、20%乌拉坦、肝素（1000U/ml）、针灸针等。

6、与理论课程的关系：本实验项目与第四章 第二节针灸调节个系统作用及机理、以及第五章 针灸作用效应的基本特点相关。

（七）实验项目八：针灸治疗新技术和电针参数客观显示

1、实验项目学时：2学时

2、实验项目类型：观察性实验

3、实验项目内容：

l 针灸治疗新技术：在老师指导下使用并体验针灸治疗的新仪器

l 电针参数客观显示

（1）打开生理记录仪和计算机电源。

（2）打开电针仪电源。

（3）将电针仪输出端分别与多道生理记录仪输入端的两极相连（生物电探测电极正负极分别与电针仪正负电极相连）。

（4）将波形选择旋钮分别置于“连续”、“疏密”、“断续”位置，观察电脑屏幕上显示的3种波形，并将其保存下来。

（5）测量连续波波幅：将电针仪波形选择旋钮置于“连续”位，频率旋钮置于“6”档，强度旋钮分别置于“1”、“2”、“3”、“4”档，测量各档脉冲幅度。

（6）测量连续波波宽：将电针仪强度旋钮置于“2”档，频率旋钮置于“6”档，波形选择旋钮置于“连续”位，测量脉冲宽度。

（7）测量连续波输出频率： 电针仪强度置 “1”、“2” 档， 连续波频率旋钮分别置 “1”～“9”档，测量各档频率大小并记录。以连续波形频率刻度（1～9）为横坐标，各档实测的频率数为纵坐标，画出刻度-频率线性相关图，以检测该仪器是否达到线性相关质量要求。

（8）波形选择旋钮分别置“疏密”和“断续”位。观察这两种波形、频率有何不同。

4、实验项目学习要求：

运用知识：电针波形特点

5、主要仪器设备与材料：　BL-420多道生理记录仪、G6805Ⅱ型电针治疗仪。

6、与理论课程的关系：本实验项目与第三章 针灸作用技术的科学基础相关。

四、实验考核

（一）实验考核项目和比例：

总评成绩由：考勤、课堂讨论总结和实验报告三部分构成.

其比例是：考勤：10%，课堂讨论总结20%，实验报告70%。

（二）考核项目评分依据：说明考核项目的评分标准。

各项目依据《实验针灸学实验课成绩管理办法》进行评分。

（三）实验考核结果反馈：①反馈实验考核项目学生成绩；②反馈学生操作、讨论、实验报告的质量以及提高建议。

①通过课堂上的实验汇报，以了解学生的实验操作情况及当中存在的问题，同时也能了解学生分析、总结的能力，发现问题、解决问题的能力，从而有针对性的进行指导、评价和鼓励，促其改进或进一步完善。

②通过实验报告的书写，能了解学生的学习态度、数据整理能力和逻辑表达能力，对其报告书写评价，并及时反馈给学生，以促其改进。

                                                  主持编写人：刘阳阳

                                           协助编写人：郭义 赵雪 王秀云